RPMI-7951【人黑色素瘤細胞】發(fā)貨時，保證細胞處于生長對數(shù)期；貼壁細胞達到75%以上匯合度，約1×106/T25細胞培養(yǎng)瓶；傳代次數(shù)4代以內(nèi)；凍存細胞發(fā)2個凍存管；無微生物污染。
RPMI-7951【人黑色素瘤細胞】描述
細胞生長：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞數(shù)量：1×106個
細胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代
細胞純度：92.2％
細胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細胞凍存：液氮凍存（完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細胞運輸：干冰運輸（1 Vial）或活細胞運輸（T-25 flasks）
細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和**
RPMI-7951【人黑色素瘤細胞】培養(yǎng)條件
1640,90%；上等胎牛血清，10%
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
溫度：37攝氏度
收到細胞后如何操作：
首先，觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與我司聯(lián)系。
用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進行觀察。仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中，備用；細胞傳代時，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
確認細胞狀態(tài)良好后，應(yīng)及時將細胞凍存，再進行后續(xù)的實驗，避免后期實驗失誤可能發(fā)生細胞污染或死亡而導(dǎo)致的細胞丟失。
建議客戶收到細胞后前3天，100X、200X、400X各拍3-5張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)支持溝通交流。
預(yù)防細胞污染的注意事項：
1.實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風(fēng)機運轉(zhuǎn)5-10min再開始實驗操作。
2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于空氣的流通；實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
3.每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。
4.操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔**。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，*后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。
6.定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
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