pET32系列載體是設(shè)計(jì)用來克隆構(gòu)建和高水平融合表達(dá)表達(dá)帶有109個(gè)氨基酸Trx標(biāo)簽的蛋白質(zhì)序列。將基因插入到載體的多克隆位點(diǎn),能夠獲得融合表達(dá)蛋白質(zhì)。同時(shí)融合蛋白包含有His標(biāo)簽和S標(biāo)簽,這些可以用于蛋白表達(dá)檢測(cè)和純化過程。
載體的多克隆位點(diǎn)見上面的圖譜。需要注意的是圖譜中的核苷酸編碼順序是以pBR322載體的復(fù)制方向?yàn)檎较?,所以T7表達(dá)區(qū)域在圖譜中是處于反向的位置。T7 RNA聚合酶啟動(dòng)的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動(dòng)蛋白表達(dá),同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。