穿刺培養(yǎng)基數(shù)量： 大量
保質(zhì)期： 一年
保存條件： 常溫避光保存

穿刺培養(yǎng)基注意事項：提取過程應(yīng)盡量在低溫環(huán)境中進(jìn)行，蛋白質(zhì)的去除以酚/混合效果*好，可以采取多次抽提盡量將蛋白質(zhì)除干凈，在沉淀DNA 時通常使用冰乙醇，在低溫條件下放置可使DNA沉淀完全。同時反應(yīng)中加入的鹽濃度一定要控制好，當(dāng)加入的鹽溶液濃度太低時，穿刺培養(yǎng)基只有部分DNA形成DNA鉀鹽而聚合，這樣就造成DNA沉淀不完全，當(dāng)加入的鉀溶液濃度太高時，其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于過多的鹽雜質(zhì)存在，影響DNA的酶切等反應(yīng)，必須要進(jìn)行洗滌或重沉淀。一般情況下都是加入的*終濃度達(dá)0.1～0.25mol/L為宜。一、穿刺培養(yǎng)基設(shè)計兩對引物，A（1上游，2下游），B(3上游，4下游）,A的下游引物和B的上游引物至少有15個堿基的重疊部分。A，B基因擴(kuò)增出來后，回收純化。用高真酶擴(kuò)增。
二、然后將A、B的回收產(chǎn)物1：1加入到PCR體系中，作為模板，用1，4引物拼接A、B，形成融合基因。
穿刺培養(yǎng)基分子生物學(xué)實驗技術(shù)都有哪些：PCR 分子克隆 核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳 測序 DNA,RNA 提取 轉(zhuǎn)化外源DNA 體外轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄 cDNA文庫構(gòu)建 原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交 藍(lán)白斑篩選、***篩選 基因工程技術(shù)大部分都是依據(jù)分子生物學(xué)原理設(shè)計出來的.