放線菌酮熒光定量PCR技術(shù)，即是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。具有應(yīng)用范圍廣，靈敏度高，操作簡便、特異性和可靠性更強(qiáng)、自動(dòng)化程度高、無污染、具實(shí)時(shí)性和準(zhǔn)確性等特點(diǎn)。              

RNA提取（Trizol法）

Trizol試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，放線菌酮?jiǎng)?/b>并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯仿時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層（無色）主要為RNA，有機(jī)層（黃色）主要為DNA和蛋白質(zhì)。