Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
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產(chǎn)品名稱: Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
產(chǎn)品型號: Hieff? HS Pfu DNA Polymerase
產(chǎn)品展商: HZbscience
產(chǎn)品文檔: 無相關(guān)文檔
簡單介紹
Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶的基礎(chǔ)上添加了在常溫下能夠抑制5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的兩種單克隆抗體，Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶可進行高特異性的熱啟動(Hot Start)PCR，擴增產(chǎn)物為平端。
Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
的詳細介紹
Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
產(chǎn)品描述
HieffTM HS Pfu DNA Polymerase在HieffTM Pfu DNA Polymerase（Cat No: 10113ES60）的基礎(chǔ)上添加了在常溫下能夠抑制5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的兩種單克隆抗體，可進行高特異性的熱啟動(Hot Start)PCR，擴增產(chǎn)物為平端。HieffTM Pfu DNA Polymerase是經(jīng)過基因工程改造的，新一代超保真DNA聚合酶，具有極高的擴增效率和廣泛的模板適應(yīng)性，可用于幾乎所有PCR反應(yīng)。其行進性 (processivity)得到了大幅度提升，即使是非常復(fù)雜的模板，也能準(zhǔn)確快速的完成反應(yīng)。其錯配率是普通Taq酶的1/52，是Pfu酶的1/6；且擴增速度可以達到15秒/kb。
Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶本產(chǎn)品中附帶的5× HS Pfu buffer對于簡單或復(fù)雜模板、短片段或長片段PCR擴增都具有良好的適應(yīng)性。緩沖液中已經(jīng)含有10 mM Mg2+ (1×終濃度為2 mM)，可以使用產(chǎn)品中提供的DMSO/MgSO4對反應(yīng)體系進行優(yōu)化。另外，產(chǎn)品中附帶的PCR Enhancer可有助于高GC含量片段的擴增。
Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
活性定義
用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，74℃ 30分鐘內(nèi)，攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位（U）。
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。收到產(chǎn)品后放到-20 oC保存。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測：10 U本品和0.6 μg λ-HindⅢ在74 oC下孵育1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測：10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 oC下孵育1小時，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
大腸桿菌殘留DNA檢測: 50 μl體系中，加入2U本品，以ddH2O為模板，擴增E.coil 16s rDNA基因。35個循環(huán)后擴增產(chǎn)物進行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，無擴增條帶。Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
功能檢測1：50 μl PCR體系中加入1U本品，以100 ng人基因組DNA為模板擴增α-1-antitrypsin基因。30個循環(huán)后取10% PCR產(chǎn)物進行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，觀察到單一的8.2 kb條帶。
功能檢測2：50 μl PCR體系中加入1U本品，以10 ng λDNA為模板擴增30個循環(huán)，取10% PCR產(chǎn)物進行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，觀察到單一的15 kb條帶。Hieff? HS Pfu DNA Polymerase熱啟動型高保真酶
