雙鏈DNA補(bǔ)平和連接試劑盒是利用大腸桿菌DNA多聚酶I的Klenow片段多聚酶活性能夠補(bǔ)平不互補(bǔ)的5’端突出為基礎(chǔ)。對(duì)于用2個(gè)不同限制性內(nèi)切酶酶切所獲得的片段，可以選擇性補(bǔ)平一端。再通過(guò)T4 DNA連接酶對(duì)平末端DNA進(jìn)行有效連接，此試劑盒操作簡(jiǎn)便，全過(guò)程可在1 h內(nèi)完成。在連接緩沖液中加入PEG提高平末端DNA的連接效率。雙鏈DNA補(bǔ)平和連接試劑盒連接過(guò)程中載體DNA可自環(huán)化，片段會(huì)連成寡聚體。優(yōu)化插入片段和載體末端濃度和比率有利于提高正確連接產(chǎn)物的產(chǎn)率。

特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)便，全過(guò)程可在1 h內(nèi)完成。雙鏈DNA補(bǔ)平和連接試劑盒
在連接緩沖液中加入PEG提高平末端DNA的連接速率。

應(yīng)用

雙鏈DNA補(bǔ)平和連接試劑盒連接、轉(zhuǎn)化

組份

Klenow DNA Polymerase, 3 U/μl;10 × Klenow Reaction Buffer;0.5 mM dNTP Mix;T4 DNA Ligase, 2 U/μl;10 × Ligation Buffer;50% PEG 4000;Sterilized ddH2O;操作手冊(cè)雙鏈DNA補(bǔ)平和連接試劑盒1172 甲基 2,3,4,6-O-四乙酰基-BETA-D-硫代吡喃半乳糖苷, M120900 美國(guó)Amresco C15H22O9S 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1173 甲基-1-硫代-β-D-半乳糖苷, 98% M120901 美國(guó)Amresco C7H14O5S 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1174 甲基 β-吡喃木糖苷, 99% M120913 美國(guó)Amresco C6H12O5 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1175 L-(-)-甘露糖, 99% M120942 美國(guó)Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1176 D-(+)-松三糖水合物, 99% M120953 美國(guó)Amresco C18H32O16·xH2O 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1177 麥芽糖漿, 分子生物學(xué),20% in H2O M120965 美國(guó)Amresco C12H22O11 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1178 6-O-α-D-麥芽糖基-β-環(huán)糊精, 98% M121037 美國(guó)Amresco C54H90O45 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1179 麥芽四糖醇, 97% M121039 美國(guó)Amresco C24H44O21 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1180 甲基乙二醇?xì)ぞ厶? 70% M121042 美國(guó)Amresco 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1181 麥芽七糖, 80% M121063 美國(guó)Amresco C42H72O36 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1182 麥芽五糖, 95% M121065 美國(guó)Amresco C30H52O26 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月
1183 麥芽六糖, 95% M121068 美國(guó)Amresco C36H62O31 大量 g/mg 美國(guó)/中國(guó) 上海滬震常溫，避光 12個(gè)月