elisa試劑盒的處理和保存注意事項(xiàng)
elisa試劑盒在處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面:
(1)elisa試劑盒血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。
樣本的長(zhǎng)期保存,應(yīng)在-70℃以下。
(2)冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等造成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的
蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置
混勻即可。
(3)標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)**污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉積后取上清檢測(cè)。
(4)要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為標(biāo)記酶
的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HR
P底物反響顯色。
(5)樣本的采集及血清別離中要留意盡量防止**污染,一則**的成長(zhǎng),其所排泄的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等
蛋白發(fā)生分解效果;二則一些**的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法發(fā)生
非特異性干擾。