pET50b載體攜帶有N端的Nus標簽和His純化標簽，緊跟著這些標簽的有一個HRV3C蛋白酶切位點。這個HRV3C蛋白酶切位點能夠特異性的高效切割 “LEVLFQ↓GP”氨基酸序列，酶活力在低溫下很強。pET-50b(+)載體上還含有一個可選擇的C端Thrombin蛋白酶切位點和S標簽序列。
載體的單一的多克隆位點見上面的環(huán)狀質粒圖譜。注意：載體序列是以pBR322質粒的編碼規(guī)矩進行編碼的，所以T7蛋白表達區(qū)在質粒圖譜上面是反向的。
T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區(qū)域在質粒圖譜中也被標注了出來。質粒的F1復制子是被定向的，所以在T7噬菌體聚合酶的作用下，包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生，并啟動蛋白表達，同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。
